Doğal Ortamdan İzole edilen Alkalifilik Bacillus sp. Suşlarında alfa-Amilaz Üretimi, Enzimin pH ve Sıcaklık Stabilitesinin Araştırılması


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Çukurova Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyoloji, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2001

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Özlem Kıran

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): BURHAN ARIKAN

Özet:

oz DOKTORA TEZİ DOĞAL ORTAMDAN İZOLE EDİLEN ALKAL1FILIK BACILLUS S P. SUŞLARINDA a- AMİLAZ ÜRETİMİ, ENZİMİN pH VE SICAKLIK STABİLİTESİNİN ARAŞTIRILMASI ÖZLEM KIRAN ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ BİYOLOJİ ANABİLİM DALI Danışman : Doç. Dr. Burhan ARIKAN Yıl: 2001, Sayfa: 88 Jüri : Prof. Dr. Ömer ÇOLAK, Prof. Dr. Nedim UYGUN, Doç. Dr. Ferit KARGIN, Yrd. Doç. Dr. Nursel DOSTBİL Bu çalışmada Van Gölü çevresinden izole edilen, Bacillus sp. suşlarından V12.3 olarak adlandırılan suş seçilmiştir. Seçilen bu suşun mevcut amilaz üretme yeteneği ve bu enzimin özellikleri araştırılarak endüstriyel alanda kullanılması amaçlanmıştır. Çalışmamızda bu suşdan elde edilen amilaz enziminin termal stabilitesi araştırılmış ve aktivitenin 60° C'de %100 korunurken, 70° C'de %74, 80° C'de % 72, 90 °C'de %64 ve 100 °C'de %56 düzeyinde aktif kaldığı tesbit edilmiştir. Bu sonuçlara göre V12.3 suşunda elde edilen enzimi termostabil olarak değerlendirmek mümkündür. Amilaz enziminim optimum pH aralığına bakıldığında maksimum relatif aktivite pH 9.5 'de %100, pH 9-10.5 aralığında enzim stabilitesinin ortalama %92 olduğu gözlenmiştir. Bu veriler enzimin alkali olduğunu göstermektedir. pH 10 'da ve 55 °C'de üretilen enzime, zimogram yapılarak moleküler ağırlıkları farklı olan iki bant elde edilmiştir. Bu bantlardan birincisinin ortalama 44.500 Dalton, ikincisinin ortalama 104.000 Dalton ağırlığa sahip olduğu bulunmuştur. Anahtar Kelimeler : Bacillus, Amilaz, Sıcaklık, pH, SDS-PAGE.