SSCP yöntemi ile beta talasemi mutasyonlarının belirlenmesi

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Çukurova Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Temel Tıp Bilimleri, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2004

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Betül Özoğlu

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): MEHMET AKİF ÇÜRÜK

Özet:

ÖZET SSCP Yöntemi İle P-Talasemi Mutasyonlannın Belirlenmesi Hemoglobinopatiler genetik hastalıklar içinde en yaygın olanıdır. Orak hücre anemisi ve p-talasemi hemoglobin hastalıklarının büyük bir kısmını oluştur. Her iki hastalık da 11 nolu kromozom üzerindeki P globin genindeki mutasyonlardan meydana gelmektedir. Talasemi; hemoglobinin yapısındaki globin zincirinden bir veya birden fazlasının yapım azlığı veya hiç yapılmama durumudur. P-talasemide genel moleküler patoloji p gen bölgesindeki tek gen mutasyonudur. Ülkemizdeki talasemi mutasyonları çok heterojendir. Toplam 35' in üzerinde mutasyon olduğu bilinmektedir. Mutasyonlarm dağılımı bölgeler arasında büyük farklılıklar göstermektedir. Çukurova bölgesinde p-talasemi daha yaygın olarak görülmekte olup beta geni üzerinde 20 farklı mutasyon belirlenmiştir. PCR-SSCP amplifiye edilmiş DNA da dizi değişikliğini belirlemek için basit ve güçlü bir tekniktir. PCR temeline dayalı ön tarama yöntemlerini seçerken maliyeti ile birlikte hassasiyet ve çok sayıda örneğin birlikte incelenmesi de önemlidir. SSCP' de 200 baz çiftlik PCR ürünleri kullanıldığında tek baz değişimi için hassas bir yöntem olarak bilinmektedir. Bu çalışmada amplifiye edilmiş çift zincirli DNA örnekleri kullanarak mutasyonlarm varlığını gösteren en iyi deney koşulları belirlendi. Anahtar Sözcükler: P-talasemi, Anormal Hemoglobin, PCR, SSCP ıx