Cold Aktif Alkalin Amilaz Enzimi Üreten Bacillus sp. Suşlarının İzolasyonu, Enzim Üretimi, Karakterizasyonu ve Endüstriyel Kullanım Olanaklarının Araştırılması

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Çukurova Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyoloji, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2011

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Nihan Arabacı

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): BURHAN ARIKAN

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada, Ankara ve Tuz Gölü'nden izole edilen alkalifilik Bacillus sp. suşlarından amilaz enzimi izolasyonu ve karakterizasyonu yapılmıştır. Bu amaçla, enzimin optimum aktivite sıcaklığı ve pH'sı, pH stabilitesi, sıcaklık stabilitesi, SDS-PAGE zimogram analizi ve ince tabaka kromatografisi analizi gerçekleştirilmiştir.Bacillus sp. NCA35 amilaz enziminin moleküler ağırlığı SDS-PAGE zimogram analizinde 205 kDa bulunmuştur. Enzim optimum aktivitesini 25ºC ve pH 8.0'de göstermiştir. Enzim 10-40ºC arasında 30 dakikada aktivitesinin yaklaşık %96'sını korumuştur. Amilaz enzimi 25ºC'de 24 saat süreyle ortalama %53 stabil kalmıştır. Enzimin aktivitesi %3 NaCl'de 60 dakika süre ile %56 korunmuştur. Enzimin aktivitesini %1 ß-merkaptoetanol (%103) indüklerken, 5mM BaCl2, EDTA, CaCl2, NaCl, ZnCl2, MnCl2, 3mM PMSF ve 8M üre, sırasıyla, %27, %42, %35, %43, %40 %36, %41 ve %58 inhibe etmiştir. İnce tabaka kromatografisi analizinde, reaksiyon ürünlerinin glikoz, maltoz ve maltoz türevli oligosakkaritler olduğu bulunmuştur.Bu sonuçlara göre, NCA35 enzimi, soğukta aktif, asido-alkali, termostabil ve pH-stabil özellik göstermektedir. Bu özelliklerinden dolayı NCA35 amilaz enzimi, deterjan, gıda ve içecek endüstrileri ile biyoremediasyon uygulamalarında ve prebiyotik üretiminde kullanılabilme potansiyeline sahiptir.