Bacillus spp. Suşlarından Keratinaz İzolasyonu ve Enzimin Kısmi Karakterizasyonu
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Çukurova Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyoloji, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2003
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: Hümeyra HÜR
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): HATİCE KORKMAZ GÜVENMEZ
Özet:öz YÜKSEK LİSANS TEZİ BACİLLVSSPP. SÜŞLARINDAN KERATİNAZ İZOLASYONU VE ENZİMİN KISMİ KARAKTERİZASYONÜ HÜMEYRAHÜR ÇUKUROVA ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜ BİYOLOJİ ANABİLİM DALI Danışman : Yrd. Doç. Dr. Hatice GÜVENMEZ Yıl: 2003 Sayfe: 102 Jüri : Yrd.Doç.Dr. Hatice GÜVENMEZ Prof.Dr.Ömer ÇOLAK Yrd. Doç. Dr. Nursel DOSTBÎL Bu çalışmada, Çukurova Üniversitesi Tavuk Çiftliği atığından, tavuk tüyünü parçalayan Bacillus licheniformis HK-1 susu izole edilmiştir. B. licheniformis HK-1 susu, doğal tavuk tüyü tozu içeren besiyerinde üretildiğinde, yüksek keratinolitik aktivite gözlenmiştir. B. licheniformis HK-1 susu, 16S rRNA dizin analizi, biyokimyasal testler ve morfolojik özelliklere dayanarak teşhis edilmiştir. Maksimum keratinaz üretimi, 50 °C ve başlangıç pH sı 8 de gözlenmiştir, Enzim, geniş pH (optimal pH 11) ve sıcaklık aralığında (optimal sıcaklık 60 °C) aktivite göstermiş Ve 60 °C kadar stabilitesini korumuştur. Enzimin molekül ağırlığı SDS-PAGE analizi ile yaklaşık 46 kDa olarak hesaplanmıştır. Kısmi saflaştırma yapılmış enzimin, zymogram analizi sonucunda tek bir bant halinde gözlenmesi enzimin saflığım ifade etmektedir. Kültür süpernatantı içerisine konan intakt tavuk tüyleri 60 °C'de 3 günde tamamen parçalanmıştır. Keratinolitik aktivite, EDTA, 1,10-phenanthroline, NaCI ve PMSF tarafından kısmen inhibe edilmiştir. ZnC^ ile muamele edilen enzim aktivitesi ciddi anlamda düşmüştür. Diğer taraftan keratinolitik aktivite, DMSO, Triton X-100, SDS, Caöb ve Na2(SÛ3) tarafından arttırılmıştır. Sonuçlara göre; Bacillus licheniformis HK-1 susundan elde edilmiş keratinazın, alkali metalloproteaz grubuna ait olduğu saptanmıştır. Sonuç olarak, B. licheniformis HK-1 susu, mevcut keratinolitik hidrolizleri içeren, biyoteknolojik proseslerde basan ile kullamlanılabilir. Anahtar Kelimeler: Bacillus licheniformis, Keratinaz, Tavuk Tüyü.