Bu araştırmada hıyarlarda ovül-ovaryum kültüründe spermidine ve putrescine uygulamalarının haploid embriyo uyartımına etkileri araştırılmıştır. Çalışmada Sardes Fı, Cemre Fı, Altay Fı, Toros Fı ve Langa olmak üzere 5 çeşit kültüre alınmıştır. Ovül kültürü denemesinde ovüller izole edilerek katı MS ortamında kültüre alınmıştır. Ovaryum kültüründe başlangıç olarak sıvı ortam kullanılmış olup, embriyo gelişimi için katı kültürle devam edilmiştir. Ovül kültürü uygulamalarında embriyo uyartımı için 0.18 μM/l Thidiazuron (TDZ) ilave edilmiş vitamin içeren MS besi ortamı kullanılmıştır. Poliaminlerin etkisini araştırmak için spermidine (Spd) ve putrescinenin (Put) 40, 80, 120, 160 ve 200 μM/l dozda ayrı ayrı ve ikisi birlikte 80, 160, 240, 320 ve 400 μM/l (1:1, v/v) dozları kullanılmıştır. Ovül kültürü denemeleri sonucunda genotiplere göre ovül gelişim oranlarında Sardes Fı çeşidi Spd+Put içeren ortamlarda, Cemre Fı çeşidi Spd, Spd+2.4D içeren ortamlarda, Altay Fı çeşidi Put içeren ortamlarda, Toros Fı çeşidi 2.4D ve Spd içeren ortamlarda ve Langa çeşidi Put içeren ortamlarda, kontrol ortamlarına göre daha iyi sonuçlar vermiştir. Sıvı kültür uygulamasında embriyo uyartımı için 0.18 μM/l TDZ ilave edilmiş MS besi ortamı kullanılmış ve Spd 160 μM/l, Put 160 μM/l ve Spd+Put 320 μM/l (1:1, v/v) dozlarında eklenerek etkileri araştırılmıştır. Sıvı kültürde Spd ve Put içeren ortamlarda daha iyi sonuçlar elde edilmiş, denemenin devamında embriyo gelişim ortamlarına alınan ovüllerden çok sayıda embriyo ve bitkicik formları elde edilmiştir. Yapılan flowsitometri analizleri sonucunda; Altay çeşidinden 2 adet, Cemre çeşidinden 2 adet olmak üzere 4 haploid bitki elde edilmiştir.
In this study, the effects of spermidine and putrescine on haploid embryo induction via ovule culture in cucumbers were studied. F1 varieties of cucumber named Sardes Fı, Cemre Fı, Toros Fı, Altay Fı and Langa were chosen for the cultivation. Two different methods as ovule culture and liquid culture applications were tried to obtain haploid plants. MS medium supplemented with 0.18 μM/l Thidiazuron (TDZ) for embryo induction was used. To determine the effects of polyamines, spermidine (Spd) and putrescine (Put) were used with the concentrations of 40, 80, 120, 160 and 200 μM/L. Furthermore, spermidine and putrescine were used together with concentration of 80, 160, 240, 320 and 400 μM/L (1:1, v/v), respectively. According to the results of the ovule culture experiments, Sardes Fı variety in mediums containing Spd+Put, Cemre Fı variety in mediums containing Spd, Spd+2.4D, Altay Fı variety in mediums containing Put, Toros Fı variety in mediums containing 2.4D and Spd, Langa variety in mediums containing Put, better ovule development was observed compared to control media. MS medium supplemented with 0.18 μM/l TDZ was used as an initial medium for embryo induction in liquid culture and Spd 160 μM/l, Put 160 μM/l and Spd+Put 320 μM / l (1:1, v / v) effects. Better results were obtained in the media containing Spd and Put.In the continuation of the experiment, embryos and callus forms were obtained from ovules taken to embryo development mediums. As a result of flow cytometry analysis two haploid plants were obtained from Altay and two from Cemre.
