BALIK YEMİ KATKISI β-GLUKANAZ ENZİMLERİ ÜRETEN REKOMBİNANT Bacillus subtilis SUŞLARININ GELİŞTİRİLMESİ
Tez Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Çukurova Üniversitesi, Su Ürünleri Fakültesi, Su Ürünleri Temel Bilimleri, Türkiye
Tez Danışmanı: Makbule Baylan
Tezin Onay Tarihi: 2012
Tezin Dili: Türkçe
Özet:
Yapılan bu tez çalışması ile
rekombinant Escherichia coli bakterisinden
β-(1,3)-glukanaz genini taşıyan pRS416G vektörü izole edilmiş ve elektrotransformasyon tekniği
kullanılarak Bacillus subtilis BR151
suşuna aktarılmıştır.
Elektrotransformasyon sonucunda bu bakterilerin laminarin içeren plaklarda
rekombinant koloni oluşturdukları gözlemlenmiştir. Rekombinant kolonilerin Congo-red
boyaması sonucunda pozitif zon oluşturması ile de üretilen proteinin aktif
olduğu anlaşılmıştır. SDS-PAGE ve zymogram analizlerinde ise β-(1,3)-glukanaz enziminden
sorumlu 125 kDa büyüklüğündeki protein bandı gösterilmiştir. Diğer taraftan, β-(1,3-1,4)-glukanaz
genini taşıyan rekombinant pNW33N/β-(1,3-1,4)-glukanaz plazmid DNA’sı, elektrotransformasyon tekniği
kullanılarak Bacillus subtilis RSKK245 suşuna
aktarılmıştır. Rekombinant B. subtilis RSKK245 kolonilerinin etrafındaki
enzimatik aktivite bölgeleri Congo-red ile boyanarak gösterilmiştir. Enzime ait
26 kDa büyüklüğündeki protein bandı ise zymogram analizi ile gösterilmiştir. Elde
edilen bu sonuçlar klonlanan genlerin başarıyla eksprese edildiğini
göstermektedir.